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細胞轉染的方法和PEI Prime ™的介紹

 更新時間:2022-01-21 點擊量:2121

細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展,轉染已經(jīng)成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產(chǎn)等生物學試驗中,其應用越來越廣泛。

轉染,是將外源性基因導入細胞內(nèi)的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入,轉染目前已成為實驗室工作中經(jīng)常涉及的基本方法。轉染大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例;化學介導方法很多,如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術;生物介導方法,有較為原始的原生質體轉染,和現(xiàn)在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。

理想細胞轉染方法,應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優(yōu)點。病毒介導的轉染技術,是目前轉染效率高的方法,同時具有細胞毒性很低的優(yōu)勢。但是,病毒轉染方法的準備程序復雜,常常對細胞類型有很強的選擇性,在一般實驗室中很難普及。其它物理和化學介導的轉染方法,則各有其特點。

需要指出的一點,無論采用哪種轉染技術,要獲得*的轉染結果,可能都需要對轉染條件進行優(yōu)化。影響轉染效率的因素很多,從細胞類型、細胞培養(yǎng)條件和細胞生長狀態(tài),到轉染方法的操作細節(jié),都需要考慮。

常見的轉染方法是脂質體轉染法:

陽離子脂質體表面帶正電荷,能與核酸的磷酸根通過靜電作用,將DNA分子包裹入內(nèi),形成DNA脂復合物,也能被表面帶負電的細胞膜吸附,再通過融合或細胞內(nèi)吞進入細胞。脂質體轉染適用于把DNA轉染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細胞中,是目前實驗室便捷的轉染方法之一,其轉染率較高,優(yōu)于磷酸鈣法。由于脂質體對細胞有一定的毒性,所以轉染時間一般不超過24小時。常用細胞類型:cos-7 BHK、NIH3T3 Hela等。

 

 

   
 

 

 

美國serochem公司成立于2019年,目標是使基因治療和生物制劑價格合理。目前,該公司主要進行PEI Prime?相關的兩款產(chǎn)品(液體和固體兩種)。

PEI是聚乙烯亞胺的縮寫。pH中性溶液中具有*正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負電的DNA牢固結合,并賦予凈陽離子電荷,使DNA進入細胞。當下,PEI是流行的瞬時轉染試劑HEK293CHO懸浮培養(yǎng)液。serochem旗下的PEI Prime是一種高性能轉染試劑,旨在實現(xiàn)高產(chǎn)量,可重復性,和可擴展的瞬時基因表達,且其是生產(chǎn)任何具有成本效益的生物制劑的很好選擇,包括重組蛋白,抗體和病毒。

PEI Prime ™是基于PEI基礎上的高性能轉染試劑,是化學轉染中的陽離子聚合物轉染試劑;在HEK293CHO細胞懸浮培養(yǎng)中具有高效性;制備簡單,價格適中,適合大規(guī)模瞬時轉染;比PEI所需時間較少。

PEI Prime的設計著眼于在PEI可擴展性基礎上,進一步提高,這使其成為可以用于大規(guī)模瞬時基因表達具有成本效益的試劑。無論轉染一毫升還是一百萬升培養(yǎng)基,我們都會提供較優(yōu)的性能,服務和價格。而北京百奧作為其國內(nèi)代理,本著一心為客戶著想,認真為客戶負責的宗旨,介紹并推薦此產(chǎn)品。