由于體外培養(yǎng)的細(xì)胞自身沒有抵抗污染的能力，而在培養(yǎng)基中加抗生素的抗污染能力也是有限的，一般在細(xì)胞受到污染早期或污染較輕時(shí)，能及時(shí)處理并除去污染物，部分細(xì)胞還有可能得到挽救。

通常情況下，會(huì)有哪些微生物會(huì)污染培養(yǎng)的細(xì)胞？

一、霉菌污染

污染的多是曲霉菌，白色念珠菌，酵母菌，黑霉菌，孢子菌等。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成淡黃色或是白色的漂浮物，一般肉眼可見，較易被發(fā)現(xiàn)，短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁。
倒置顯微鏡下可以看見細(xì)胞之間有縱橫交錯(cuò)穿行的絲狀，樹枝狀或管狀菌絲，并漂浮在培養(yǎng)液中。很多菌絲在高倍鏡下可以看見鏈狀排列的菌株。念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形，散在細(xì)胞上及細(xì)胞周邊生長(zhǎng)。

二、酵母菌污染

酵母到處存在，并能在合適的環(huán)境中快速生長(zhǎng)。酵母污染很容易觀察到，培養(yǎng)物變渾濁，尤其在后期。一般PH值變化很小，嚴(yán)重時(shí)，PH值升高。顯微鏡下呈卵圓形或球形顆粒，有些會(huì)長(zhǎng)出較小顆粒。

三、耐藥細(xì)菌污染

細(xì)菌污染較常見的有大腸桿菌，白色葡萄球菌，假單孢菌等。加用抗菌素的培養(yǎng)液可預(yù)防和排除個(gè)別一般少量細(xì)菌的污染。一旦發(fā)生細(xì)菌污染很容易發(fā)現(xiàn)，多數(shù)情況下培養(yǎng)液短時(shí)間內(nèi)變黃，表明有大量酸性物質(zhì)產(chǎn)生，出現(xiàn)明顯渾濁現(xiàn)象；有時(shí)靜置的培養(yǎng)液起初不混，但稍加震蕩，就有許多混濁物漂起。

倒置顯微鏡下觀察，有時(shí)在細(xì)胞表面及周圍有大量細(xì)菌存在，細(xì)胞停止生長(zhǎng)并有中毒表現(xiàn)，必要時(shí)可取少量培養(yǎng)液涂片染色檢查以明確細(xì)菌種類。

四、支原體污染

支原體是一種大小介于細(xì)菌和病毒之間(小直徑0.2um)并獨(dú)立生活的微生物．約有1%可通過(guò)濾菌器。支原體無(wú)細(xì)胞壁形態(tài)呈高度多形性，可為圓形、絲狀或梨形。

支原體形態(tài)多變，在光鏡下不易看清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。多數(shù)支原體適合于偏堿條件下生存(PH7.6-8.0)，對(duì)酸耐受性差。對(duì)熱比較敏感，對(duì)一般抗生素不敏感。

支原體污染細(xì)胞后，培養(yǎng)液可不發(fā)生混濁。多數(shù)情況下細(xì)胞病理變化輕微或不顯著，細(xì)微變化也可由于傳代、換液而緩解，因此易被忽視。但個(gè)別嚴(yán)重者，可致細(xì)胞增殖緩慢，甚至從培養(yǎng)器皿脫落。

為確定有無(wú)支原體污染可做如下檢測(cè)：熒光染色法支原體檢測(cè)、PCR法支原體檢測(cè)、qPCR支原體檢測(cè)、電鏡檢查。

五、黑膠蟲污染

黑膠蟲污染細(xì)胞后，細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)變緩慢，與細(xì)胞共生，競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)，培養(yǎng)液可不發(fā)生混濁。細(xì)胞間隙內(nèi)出現(xiàn)小黑點(diǎn)，會(huì)不斷變多，且對(duì)各類抗生素?zé)o效，顯微鏡下可以看到小黑點(diǎn)原地跳動(dòng)，細(xì)胞狀態(tài)變化會(huì)因?yàn)閭鞔?、換液而有所改善，因此易被忽視。但個(gè)別嚴(yán)重者，可致細(xì)胞空泡化，出現(xiàn)很多細(xì)胞碎片等。

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