基因沉默主要指基因表達的抑制和沉默現(xiàn)象。在生物體內(nèi),基因的表達受到嚴格調(diào)控,而基因沉默就是一種重要的基因表達調(diào)控方式。根據(jù)作用方式的不同,基因沉默可分為自然發(fā)生的基因沉默和人為操作的基因沉默。自然發(fā)生的基因沉默可通過多種因素實現(xiàn),如DNA甲基化、異染色質(zhì)形成、轉(zhuǎn)錄后基因沉默(RNAi)等。而人為操作的基因沉默則可以通過基因敲除、轉(zhuǎn)錄因子抑制、表觀遺傳修飾等方法實現(xiàn)。那么,常用的基因沉默技術(shù)有哪些?一起來學習一下吧!
RNA干擾(RNAi):RNAi技術(shù)利用雙鏈RNA(dsRNA)引發(fā)特異性mRNA的降解,從而降低或關(guān)閉目標基因的表達。RNAi技術(shù)具有高效、特異性強、操作簡單等優(yōu)點,已成為研究基因功能和藥物篩選的重要工具。然而,該技術(shù)也存在一定的脫靶效應和細胞毒性等問題。
化學沉默:化學沉默是指通過特定的化學抑制劑或藥物作用于細胞,干擾基因的表達或轉(zhuǎn)錄過程,從而實現(xiàn)基因沉默。常用的化學沉默藥物包括DNA甲基化抑制劑、組蛋白去乙?;敢种苿┑?。這類方法的優(yōu)點是可以通過口服或注射給藥,直接作用于患者體液或組織,但對于作用機制和藥物劑量要求較高。
基因敲除:基因敲除技術(shù)通過同源重組或CRISPR-Cas9等手段,將目標基因進行部分或wan全敲除。該技術(shù)具有較高的特異性和可操作性,但需要設計特異性的核酸酶,且存在一定的細胞毒性風險。
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