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磁珠
AM2001小鼠CD3/CD28激活磁珠
產(chǎn)品型號(hào):AM2001
更新時(shí)間:2025-04-27
廠(chǎng)商性質(zhì):代理商
訪(fǎng)問(wèn)量:52
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一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介
英諾思(immuno-X)小鼠CD3/CD28激活磁珠用于激活小鼠T細(xì)胞,促進(jìn)T細(xì)胞增值和T細(xì)胞分化。該產(chǎn)品利用三維立體磁珠模擬抗原呈遞細(xì)胞對(duì)T細(xì)胞的激活,ActBeads TM提供的第一信號(hào)(CD3)和第二信號(hào)(CD28)使得T細(xì)胞高效擴(kuò)增,避免T耗竭。
• ActBeads™ 激活磁珠濃度為4x107個(gè)/mL。
• 磁珠粒徑均yi,流式細(xì)胞儀分析時(shí)可與T細(xì)胞明顯區(qū)分
二、試劑盒組分
產(chǎn)品名稱(chēng) | 存儲(chǔ)條件 | 緩沖液成分 | 功能 |
ActBeads™ Mouse CD3/CD28 Activator | 4°C保存,避免冷凍 | PBS, 0.1% BSA | 通過(guò)磁珠偶聯(lián)的CD3/CD28抗體激活T細(xì)胞,促進(jìn)T細(xì)胞增值和分化 |
BSA - bovine serum albumin; PBS - phosphate-buffered saline
運(yùn)輸條件: 4°C運(yùn)輸
三、培養(yǎng)條件
·緩沖液:RPMI1640 培養(yǎng)基+10% FBS + 2 mM L-Glutamine+100 U/mL penicillin/streptomycin
·細(xì)胞因子:人或者小鼠的IL2
四、溫馨提示
hIL2在人和小鼠細(xì)胞中具有同等活力
小鼠T細(xì)胞分離時(shí),確保FACS Buffer滲透壓穩(wěn)定,小鼠免疫細(xì)胞非常敏感
IL7、IL15可與IL2聯(lián)合使用,促進(jìn)T細(xì)胞增值
五、實(shí)驗(yàn)步驟
1. 激活或者擴(kuò)增T細(xì)胞
步驟 | 說(shuō)明 |
1 | 分離小鼠T細(xì)胞,將其鋪到96孔平底板中,細(xì)胞密度為8 x 104/孔,培養(yǎng)基200 μL |
2 | ActBeads™ 小鼠CD3/CD28激活磁珠震蕩混勻后,加入到細(xì)胞中,2 μL/孔 Note: 激活T細(xì)胞時(shí),ActBeads TM和細(xì)胞比例為1:1;誘導(dǎo)Treg細(xì)胞分化時(shí),磁珠和細(xì)胞的比例應(yīng)增加到2:1 |
3 | 加入IL2細(xì)胞因子,終濃度為100 U/mL |
4 | 進(jìn)行T細(xì)胞培養(yǎng),5% 二氧化碳,37℃ |
5 | 培養(yǎng)48-72小時(shí)后,T細(xì)胞體積變大,形態(tài)多樣 |
6 | 當(dāng)細(xì)胞密度較高時(shí),更換新鮮培養(yǎng)基或者將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)板 |
2. T細(xì)胞重新刺激
通常T細(xì)胞在擴(kuò)增到第7-10天時(shí),需要通過(guò)添加新鮮的ActBeads™ 和IL-2進(jìn)行多次重新刺激。經(jīng)過(guò)反復(fù)重新刺激后,CD8+ T細(xì)胞仍保持細(xì)胞毒性。
步驟 | 說(shuō)明 |
1 | 將T細(xì)胞重懸后置于無(wú)菌離心管中,在磁力架上吸附2分鐘 |
2 | 倒出/吸出T細(xì)胞,進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù) |
3 | 將T細(xì)胞重新鋪到培養(yǎng)板中,密度0.5–1 × 106 cells/mL |
4 | 培養(yǎng),5% 二氧化碳,37℃ |
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