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你知道細(xì)胞表面染色實(shí)驗(yàn)操作流程是什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!一、細(xì)胞計(jì)數(shù)將培養(yǎng)好的細(xì)胞收集于15mL離心管并計(jì)數(shù);500g離心4min,去上清。二、制備單細(xì)胞懸液將收集的細(xì)胞用1mL0.5%BSA/PBS溶液重懸,400g離心3min,去上清,重復(fù)2次;用0.5%BSA/PBS溶液重懸細(xì)胞至濃度1x106個(gè)細(xì)胞/mL,分配到96孔板中,每孔100μl細(xì)胞懸液。三、阻斷Fc受體室溫孵育10-20min。四、一抗孵育每孔加入稀釋后的一抗溶液100μl,2-8℃反應(yīng)30min。五、...
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免疫細(xì)胞化學(xué)(ICC)是一種使用熒光抗體或染料來(lái)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)靶抗原的技術(shù)。那么免疫細(xì)胞(ICC)實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題有哪些?讓我們一起來(lái)看看吧!一、熒光信號(hào)弱1.樣品質(zhì)量選用新鮮制備的樣本以及適當(dāng)?shù)谋3謼l件。2.靶標(biāo)豐度低適當(dāng)提高一抗?jié)舛?。選擇熒光強(qiáng)度更強(qiáng)的二抗。3.固定方法不當(dāng)甲醛和蛋白的氨基通過(guò)共價(jià)鍵結(jié)合,可能會(huì)遮蓋抗原表位,導(dǎo)致靶表位信號(hào)減弱。建議調(diào)整抗原修復(fù)方法或固定方法。多聚甲醛會(huì)與GFP熒光蛋白發(fā)生醛化反應(yīng),導(dǎo)致信號(hào)減弱。檢測(cè)膜蛋白一般不建議使用甲醇或丙酮固定,有機(jī)溶劑能夠...
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細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源性基因?qū)氲郊?xì)胞內(nèi)的技術(shù)。那你知道細(xì)胞轉(zhuǎn)染的分類方法是什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!一、根據(jù)導(dǎo)入的核酸存在的時(shí)間長(zhǎng)短,可分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染瞬時(shí)轉(zhuǎn)染:指將構(gòu)建好的質(zhì)粒通過(guò)某種方式導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi),該質(zhì)粒上的外源基因不整合到細(xì)胞自身的基因組上。細(xì)胞中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的外源基因表達(dá)時(shí)間有限,通常僅持續(xù)幾天,直到外源基因在細(xì)胞分裂過(guò)程中因各種因素丟失為止。多用于啟動(dòng)子和其他調(diào)控元件的分析。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染:外源DNA整合到細(xì)胞基因組中或作為附加體質(zhì)粒保留在細(xì)胞中。與瞬時(shí)轉(zhuǎn)染不...
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Gibco是賽默飛世爾科技的品牌組合中的重要一員。自1962年品牌創(chuàng)立以來(lái),Gibco對(duì)高品質(zhì)的追求始終如一,堅(jiān)持一以貫之的高標(biāo)準(zhǔn),以wu與倫比的創(chuàng)新、可靠性和可追溯性為科研和生物藥物的生產(chǎn)提供了堅(jiān)實(shí)的質(zhì)量保障,一直是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)和應(yīng)用科學(xué)的先驅(qū)。作為市場(chǎng)的領(lǐng)dao者,Gibco是科研、生物技術(shù)和制藥研究專業(yè)人士gong認(rèn)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)。此外,憑借廣泛的創(chuàng)新與可靠的產(chǎn)品、服務(wù)、專業(yè)知識(shí)和支持,Gibco也在科學(xué)家與他們所需的各種資源之間,建立起緊密的連接,推動(dòng)他們實(shí)現(xiàn)*研究和*生...
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自1962年以來(lái),Gibco對(duì)高品質(zhì)的追求始終如一,堅(jiān)持一以貫之的高標(biāo)準(zhǔn),以wu與倫比的創(chuàng)新、可靠性和可追溯性為您的科研和生產(chǎn)提供堅(jiān)實(shí)的質(zhì)量保障,使科學(xué)家能夠安心專注于解決比細(xì)胞培養(yǎng)更重要的問(wèn)題。如今,最初位于紐約格蘭德島的Gibco生產(chǎn)基地只是全球眾多Gibco細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品的生產(chǎn)基地之一,在支持生命科學(xué)領(lǐng)域科研人員的同時(shí),還是生物制藥行業(yè)的供應(yīng)商。半個(gè)世紀(jì)以來(lái),Gibco血清等細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品保障始終如一的質(zhì)量交付,助力和見(jiàn)證了生命科學(xué)領(lǐng)域的非凡突破。胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量的...
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