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細(xì)胞污染問題分析解決細(xì)胞轉(zhuǎn)染時,細(xì)胞狀態(tài)的好壞對轉(zhuǎn)染效率有很大影響。細(xì)胞污染可能會導(dǎo)致細(xì)胞死亡,本文主要總結(jié)了細(xì)胞培養(yǎng)中常見污染現(xiàn)象和解決方法。凡是對細(xì)胞生長有危害的成分或者造成細(xì)胞不純的異物都視為污染。細(xì)胞污染根據(jù)污染源可以分為化學(xué)污染,物理污染和生物污染。本文主要描述微生物污染的現(xiàn)象及解決方法微生物污染1.細(xì)菌:細(xì)菌污染常見的有大腸桿菌,葡萄球菌等。細(xì)菌污染較易發(fā)現(xiàn),在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,培養(yǎng)液一般會在短時間內(nèi)變黃,有時靜置的培養(yǎng)液不混,稍加震蕩,變會有很多混濁...
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本文主要介紹穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的原理、步驟,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染能夠得到穩(wěn)定高表達(dá)的細(xì)胞株,是滿足活性蛋白大量制備的方法。利用哺乳動物系統(tǒng)生產(chǎn)蛋白的方式有兩種:瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。使用哺乳動物細(xì)胞表達(dá)蛋白,細(xì)胞的選擇培養(yǎng)也不可忽視。常用的有中國倉鼠卵巢細(xì)胞(CHO)和人胚腎細(xì)胞(HEK293)。德泰生物主要培養(yǎng)HEK293用于哺乳動物細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染,CHO細(xì)胞用于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。穩(wěn)定轉(zhuǎn)染通過穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建篩選出能夠穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株。針對瞬時轉(zhuǎn)染,外源基因在短時間轉(zhuǎn)錄翻譯得到的蛋白量少,1mg質(zhì)粒得到1mg...
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真核蛋白表達(dá)細(xì)胞轉(zhuǎn)染方式有兩種:瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,本文的主要介紹了兩者的定義和適用性及細(xì)胞轉(zhuǎn)染一般步驟,影響轉(zhuǎn)染效率的因素,幫助我們提高實驗的成功率。在哺乳動物細(xì)胞蛋白表達(dá)實驗,根據(jù)不同的實驗?zāi)康?,將質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)胞有兩種方法:瞬時轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。細(xì)胞轉(zhuǎn)染是將外源基因?qū)胝婧思?xì)胞的過程。質(zhì)粒、DNA、RNA將這些外源基因?qū)氲秸婧思?xì)胞內(nèi)并不容易,要跨越細(xì)胞膜的屏障進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)。瞬時轉(zhuǎn)染瞬時轉(zhuǎn)染是指外源基因?qū)氲郊?xì)胞后得以表達(dá),但是基因不整合到細(xì)胞的基因組上,因此不會隨著細(xì)胞的生長...
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人的一生中約有三分之一的時間都在睡覺,睡眠是整個動物界生存所必須的過程。有研究表明,動物在醒著的時候會受到一定程度的神經(jīng)系統(tǒng)損害,由此產(chǎn)生的受損基因和蛋白質(zhì),會在腦部堆積并引起疾病,而睡眠有助于修復(fù)這種損害并清除這些垃圾。也有實驗發(fā)現(xiàn),睡眠可以促進(jìn)與學(xué)習(xí)和記憶鞏固相關(guān)的神經(jīng)塑性重組及突觸的生長。但我們目前對于神經(jīng)修復(fù)和重組在睡眠期間的相對作用,以及其在個體發(fā)育過程中是否會發(fā)生變化仍不清楚。近日,來自英國帝國理工大學(xué)、美國加利福尼亞大學(xué)以及德克薩斯大學(xué)的研究團(tuán)隊在《Scienc...
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美國R&DSystems試劑盒其基本方法是將已知的抗原或者抗體吸附在固相載體表面,并保持其免疫活性。然后抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,美國R&DSystems試劑盒盒又保留酶的活性。在測定時,把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。美國R&DSystems試劑盒性能的重要性:①靈敏度:反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低量的能力,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒,如果待檢...
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