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你知道細(xì)胞培養(yǎng)的常見(jiàn)問(wèn)題及解決方法嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!一、培養(yǎng)細(xì)胞不貼壁原因:1.胰蛋白酶消化過(guò)度;2.支原體污染;解決方法:1.縮短胰蛋白酶消化時(shí)間或降低胰蛋白酶濃度;2.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。清潔支架或培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染,丟棄培養(yǎng)物;二、懸浮細(xì)胞成簇原因:1.培養(yǎng)液中含鈣,鎂離子;2.支原體污染;3.蛋白酶過(guò)度消化使得細(xì)胞裂解;解決方法:1.用無(wú)鈣鎂平衡鹽溶液洗滌細(xì)胞,輕巧吹吸2.細(xì)胞獲得單細(xì)胞懸液;3.分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體;三、培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢原因:1.由...
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Biodynami公司于2012年在美國(guó)亨茨維爾成立,是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售為一體的生物技術(shù)公司。產(chǎn)品聚焦二代測(cè)序(NGS)及分子克隆模塊,其中NGS產(chǎn)品2016年進(jìn)入中國(guó)市場(chǎng),以其快捷、高效的特性受到科研、制藥等用戶的信賴。高通量測(cè)序(NGS)技術(shù)因通量高、速度快等優(yōu)勢(shì)在基因檢測(cè)中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛,在基礎(chǔ)研究和臨床輔助診斷方面發(fā)揮了巨大作用,NGS實(shí)驗(yàn)流程包括核酸提取、文庫(kù)構(gòu)建、上機(jī)測(cè)序、數(shù)據(jù)分析等步驟,其中文庫(kù)構(gòu)建是非常關(guān)鍵的一環(huán),對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響最大。NGSDNA文...
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Cas9是Rna引導(dǎo)的DNA核酸內(nèi)切酶。該酶與CRISPR(聚集的規(guī)則間隔短回文重復(fù)序列)適應(yīng)性免疫系統(tǒng)相關(guān)聯(lián)各種類型的細(xì)菌,包括化膿性鏈球菌Casg,能夠解開(kāi)外源DNA(如質(zhì)粒DNA或入侵噬菌體DNA),然后檢查與20pacer互補(bǔ)的位點(diǎn)。指導(dǎo)RNA的區(qū)域。如果DNA底物與指導(dǎo)RNA互補(bǔ),則Cas9切割入侵的DNA。Cas9蛋白作為基因組工程工具受到了quan世界的關(guān)注。DNA中的雙鏈斷裂導(dǎo)致的DNA斷裂可以使基因失活或通過(guò)非同源末端連接引入異源基因。和同源重組,分別在許多...
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NovateinBio是一家生物試劑供應(yīng)商,位于大波士頓地區(qū),是最xian進(jìn)的生物醫(yī)學(xué)研究中心之一。擁有在蛋白質(zhì)生物化學(xué),蛋白質(zhì)組學(xué)和免疫分析平臺(tái)方面擁有豐富經(jīng)驗(yàn)和專業(yè)知識(shí)的科學(xué)家。提供重組蛋白、抗體、ELISA試劑盒、ELISA陣列以及其他供應(yīng)商的分銷產(chǎn)品。Cas9(CRISPR相關(guān)蛋白9)是Rna引導(dǎo)的DNA核酸內(nèi)切酶。這種酶與包括化膿性鏈球菌在內(nèi)的多種細(xì)菌相關(guān)。Casg能夠解開(kāi)外源DNA(例如質(zhì)粒DNA或入侵的噬菌體DNA),然后檢查與指導(dǎo)RNA的20堿基對(duì)間隔區(qū)互補(bǔ)的...
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胰蛋白酶是一種消化酶,可分解許多脊椎動(dòng)物消化系統(tǒng)中的蛋白質(zhì),它存在于胰液中。質(zhì)膜上的蛋白質(zhì)負(fù)責(zé)多種功能,這些功能對(duì)于維持細(xì)胞的正常生理活動(dòng)至關(guān)重要。一些質(zhì)膜蛋白(如鈣粘蛋白家族)是粘附蛋白,可作為錨,將細(xì)胞骨架蛋白連接到細(xì)胞外基質(zhì)。這有助于細(xì)胞粘附和細(xì)胞遷移。EDTA也與胰蛋白酶一起添加到細(xì)胞培養(yǎng)物中,以螯合培養(yǎng)基中的二價(jià)離子。鈣和鎂離子可能抑制胰蛋白酶的作用。在細(xì)胞培養(yǎng)物中,可以將胰蛋白酶添加到培養(yǎng)基中,通過(guò)消化粘附蛋白從培養(yǎng)皿表面釋放貼壁細(xì)胞,胰蛋白酶還通過(guò)消化粘附蛋白從...
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